Генетски и рак на имунотерапија

Затоа, се поголем интерес за нови методи на видување (насочени) терапија.

Со генска терапија се реализира трансферот на генетски материјал за терапевтски цели во клетка, ткиво или орган кога материјалот почнува да го изразат одреден ген производ.

во уметноста на рекомбинантна ДНК технологија напредок овозможи нови сознанија во однос на растот на човековите клетки, механизмите за нивното регулирање и повреда за време на процесот на туморот.

За успешно генска терапија бара следново:

• за да се идентификуваат и да се изолира функционира ген, кој по воведувањето во една клетка, ткиво или орган елиминира генетско нарушување;
• за развој на начинот на испорака на генот во клетката;
• да биде во можност за контрола на изразување на внесениот ген.

И покрај фактот дека на светот има направено повеќе од 600 клинички

студии за генска терапија, повеќето од нив претставува фаза I и II клинички испитувања. Во моментов не постои официјално санкциониран за клиничка примена на техники на генетска терапија. Во Обединетото Кралство, овој проблем е раководен од страна на Советодавниот комитет за генска терапија. Како и со другите нови терапии, генска терапија при обид да се пациенти со напреднат стадиум на рак. Сепак, во иднина, очигледно, неговата улога е особено значајно во лекувањето на рак во рана фаза, или после хируршко отстранување на туморот (на пример, се применува како адјувантна терапија).

Во моментов во развој методи во областа на генска терапија, во дел, исто така, се користи во рак имунотерапија која носи овие две тенденции во една - рак Immunogenetics.

Имунотерапија е врз основа на ефекти врз имунолошки механизми на развој на малигни тумори. Овој ефект е насочена и зголемување на активно имунитет, како и создавање на пасивни со биолошки агенси.

Имунотерапија може да биде од два вида:

• не-специфичен;
• специфични - со користење на лекови кои се врзуваат за туморски антигени.

Идејата за создавање на вакцина против рак не е нова. Таа прв пат се појави во периодот кога беше докажува улогата на инфекција во почетокот на развојот на некои тумори:

• VLCH - рак на матката;
• HBV - хепатоцелуларен карцином;
• VEB - Буркит лимфома и назофарингеален карцином.

Тогаш тоа беше предложено дека вакцината против одредени туморски антигени се чини дека да се третира и тумори, инфективна природа не е докажано. Предноста на овој метод на лекување ќе биде можно да се генерира специфични имунолошки одговор по воведувањето на генетските фактори кои биле предмет на засилување и последователните ширење преку дејствување на туморските клетки во далечните делови на телото. Повеќето модерни "истрагите на генската терапија со имуногенетски методи.

Пристапи кон рак на генска терапија

Соматска корекција генски дефект:

• генската експресија стабилизатор на раст на тумор;
• изразување прекин mugantnogo онкоген антисенс олигонуклеотид.

Генетски активирање на пролек.

Генетски имуномодулација:

• не-специфична имунотерапија;
• специфична имунотерапија.

корекција на соматска генски дефект

Генската експресија стабилизатор на раст на тумор

Супресорните гени на раст на тумор во карциногенеза губат својата функција. Целосно губење на функцијата сузбивање иницирање промовира растот на туморот или прогресија на туморот се одвива само во инактивација на двете алели на генот. На пример, p53 ген го кодира нуклеарен протеин кој делува како фактор на транскрипција, блокирање на прогресија на туморот. Околу 50% од човечката рак на клетките на туморот се открие мутираниот p53 протеин, ја изгуби својата функција. Мутациите можат да бидат наследни или стекнати. K гени, тумор супресорните гени, исто така, вклучуваат Rb1 (Ретинобластом), и E-cadherin.

Видео: Нов не-вирусен ген лек за рак

експерименти тумор модел под in vivo ген-замена мутант тумор супресорните нормално копии од гени преку вирусни вектори доведува до супресија на раст на тумор и враќање на нормална фенотип. Сепак, трансферот на овие прелиминарни наоди во клиниката не дал охрабрувачки резултати. Во фаза I и II клинички испитувања кај пациенти со NSCLC воведување p53 ген мутација на ретровирусен вектор тумори со див тип на p53 не даде ефект. Постои причина да се верува дека успешната корекција на p53 генот во комбинација со хемотерапија, како цисплатин, mozhrt намалување на изразување во клетките на туморот таа линија.

изразување прекин mutaitmogo онкоген антисенс олигонуклеотиди

Прото-онкогени - гени кои се активираат во процесот на карциногенезата. Генски производ е протеин (на пример, фактор на раст или транскрипција фактор), кој игра важна улога во регулација на клеточната пролиферација. За прекршоците од нормалното регулирање на клеточната делба, прото доволно мутација (наследна или стекната) е само еден примерок. Антисенс ДНА, олигонуклеотиди се кратки синтетички нуклеотидни секвенци кои се комплементарни со специфични секвенци на ДНК или РНК, кои се дизајнирани да се одделат онкогени. Употреба на антисенс oligonite-нуклеотиди - инхибиција на транскрипција или превод на mRNA на протеини mRNA. Со ова се намалува генската експресија и со тоа и формирање на генот производ.

Така, BCL-2 е онкоген, кој игра улога во развојот на рак на простата отпорни на хормонска терапија. Изразување на BCL-2 генот придонесува за тумор професија. Зголемена експресија на BCL-2 клетки предизвикува отпорност на апоптоза. Овој ген е цел на G3139 Антисенс молекула. На Облимерсен дрога (genasens), создадена врз основа на олигонуклеотид, во моментов е во процес на клиничките испитувања кај пациенти со напреднат рак на простата. Друг пример на антисенс олигонуклеотид поминува испитувања служи ISIS 3521 (affinitak), нејзината цел - нон-рецептор на тирозин киназа. која густина се зголемува кога голем број на цврсти тумори, вклучувајќи ги и NSCLC.

Џин активирање на пролекови

Главниот недостаток на модерен хемотерапија - недостатокот на селективноста на акција. За да се зголеми селективноста со користење на методот ген трансфер. Таргетирање ги вклучува следните чекори.

• На ген го кодира ензим кој го активира дрога, е вграден во клетките на туморот.
• После тоа, редовно се администрира пролек.
• Активирање ензим ја претворува пролек во токсичен метаболит
• Туморските клетки умира како резултат на следните измени: локалните формирање metabolita- цитотоксични ефекти на т.н. "сведок" во кои не-transgenic клетки, додека во мешовита популација на клетки убиени во присуство на лек со дифузија на вториот, и инкорпорирање на активен транспорт локалниот имун може answer- се обезбеди ефикасност на метод, дури и во отсуство на високо ефикасен трансфер на ген.

Целта на методот на ген трансфер, - максималниот број уништи клетките на туморот, а минимизирање на системска токсичност.

Методот се познати под различни имиња:

• пролек активирање генска терапија (GPAT - генетски пролек активирање терапија);
• Ген регулатива на ензимски систем пролек (GDEPT - ген-насочени ензим пролек систем);
• терапија врз основа за регулирање на ензимот пролек преку вирусни вектори (VDEPT- вирус-насочени ензим пролек терапија), ген трансфер со помош на вирусна вектори;
• самоубиствени генска терапија.

Главните недостатоци на метод ген активирање на пролекови се:

• недоволно ефикасен трансфер на ген во клетките на туморот поврзани со несовршеноста на постоечките вектори;
• потребата за директна intratumoral вбризгување на гени, во која ефектот не е честа појава, но само многу ограничен оток.

Видео: Гордон №172 рак имунотерапија

Во моментов, студии се дизајнирани да одговорат на прашањето дали ennaya активирање на прекурсори да се пресели од областа на теоријата во пракса, не се завршени уште. Еден прототип ензим пролек систем се активира генот е бактериски нитроредуктаза. Се претвора пролек SV1954 (тоа може да се администрира интравенски или интраперитонеално, без страв од компликации) во високо токсични средство за алкилирање nitrobenzamidin. Нитроредуктаза ген може да се воведе во туморот со директно вбризгување. Последователните системска администрација на SV1954 пролек ќе доведе до него одвратност во цитотоксични nitrobenzamidin само ако генот е вметнат во мобилната геном. Терапевтскиот ефективноста на овој метод се уште не е докажано, но студиите кај пациенти со рак на црниот дроб е во тек.

ген имуномодулацијата

Не-специфична имунотерапија

Целта на неспецифични имунотерапија - зголемување на имунолошкиот одговор во целина, но не предизвика имунолошка реакција против одреден антиген. Пациентот бил вакцинирани супстанции кои предизвикуваат имун одговор, кој може да се запре или бавно растот на туморот. Претходно студии се спроведени со BCG и цитокини, како што е интерферон алфа и интерлеукин-2.

специфична имунотерапија

Развој на бројни методи за индуцирање на имунолошкиот одговор на тумор специфични антигени.

Антигени цел треба да ги имаат следните карактеристики:

• изразен само во клетките на туморот, и само во многу мали количини во други ткива;
• изразени како на клетките на примарниот тумор и неговите метастази клетки;
• или признати од страна на имунолошкиот систем на површината на клетката, или во форма на фрагменти, поврзани со протеини на главен комплекс на хистокомпатибилност (MHC).

Следниве делови во моментов се потенцира во развој на методи на индукција на специфични анти-тумор имунолошкиот одговор.

Подготовките на целата клетките на туморот

Индивидуална вакцина за секој пациент генерирани врз основа на материјалот добиен од своите тумор, и обично се администрира со адјуванс подготовка, како што BCG.

Нема потреба да се идентификуваат специфичните туморски антигени.

Можноста за добивање на vysokoimmunogennyh вакцини за клиничка употреба е ограничена.

Охрабрувачки резултати на тумор вакцина на една мала група на пациенти кои имале операција за рак на дебелото црево. Вакцината малку ја зголемува времетраењето на повторување слободен период.

пептид вакцини

Ако се изолираат и да се идентификуваат со туморски антигени, пептиди добиени од антиген, може да се користи како elitopov за имунотерапија. За да го стимулира имунолошкиот систем, исто така може да се користи синтетички епитопи. До сега се тестира во интрадермален на клиника или субкутана инјекција, обично во комбинација со имунолошки адјувантна BCG. Дополнително ја зголемува можноста за администрирање на препознавање на антиген преку тумор имунолошки надзор и оттука неговото одбивање. Еден пример на одредени туморски антиген пептид, се моментално под студија, е муцин. Тоа е висока молекуларна тежина гликопротеин изразени на клетки на гастроинтестиналниот мукоза. Во голем број на малигни заболувања, вклучувајќи рак на панкреасот и рак на дебелото црево, велат нејзините експресија. Тоа се уште не е доволно докази за поддршка на корелација помеѓу имуниот одговор и клиничка корист.

ДНК вакцини

Наместо да се користи како туморски антиген протеини можат да бидат избрани како таргет ген, overexpressed кај пациенти подложени на тумор. Ова вклучува создавање на рекомбинантна ДНК вакцина, кадешто векторот се користи за пренос на ДНК што го кодира тумор протеин. Презентација на антигенски протеини предизвикува хуморалниот и клеточниот имунитет. Како цели за ДНК вакцини се избрани следниве подлоги.

• Мутираниот ген е тумор супресорните 053. присуство на повеќе од 50% од пациентите со рак.
• Carcinoembryonic антиген - гликопротеин на клеточната мембрана и неговата експресија беше забележано во поголемиот дел од пациентите со колоректален карцином. Нормално ниски нивоа на изразување на овој антиген во белешката клетките на дебелото црево, и мукозата на билијарен тракт. Ген. шифрира carcinoembryonic антиген е вметната во различни вектори, за употреба како вакцини. Иако бројни клинички испитувања во фази I и II потврди добра подносливост на ДНК вакцини против carcinoembryonic антиген, доказите за неговата клиничка ефикасност не е
• MAGE-1 - фетална генетски производ поврзани со рак на дојка и меланом.
• Протеин Her-2 / neu - EGF рецепторот, интрацелуларен домен кој поседува тирозин киназа активноста.

Во недостаток на ДНК вакцини - ограничен број на тумор-специфични антигени. Повеќето од цел антигени не се строго специфични за туморот и се изразени, иако во помали количини, од нормалните клетки. Вакцини за рак се уште треба да се оди преку клинички испитувања.

Вакцинацијата со дендритични клетки

Ефекти врз имунолошкиот систем за селективно да ја насочи својата анти-туморно ткиво, е поврзан со многу тешкотии. Тоа е исклучително важно да се избере соодветна антиген. Меѓутоа, успехот зависи и оптимална презентација на овие антигени на имунолошкиот систем. Потребата да се обезбеди ефикасна застапеност доведе до воведување на дендритичните клетки со антигени. Дендритичките клетки имаат нагласена способност за обработка на антигени и презентација потребни за развој на основното ХЛА ограничени Т-клеточен имунитет, толку важно за инфекции, автоимуни болести и малигни тумори. Овие клетки изразуваат голем број на ХЛА молекулите и други мембрана молекули. Најнови достигнувања во технологијата имаат дозволено истражување за да се посветам на ин витро дендритични клетки од прекурсори добиени од крв и коскената срцевина користење ditokinov. Може да се воведе егзогена антиген во култивирани дендритични клетки како што се тумор протеини, пептид или RNA) или ген кој шифрира туморски антиген (преку методи за физичка пренос, или вирусни вектори). Се надеваме дека со истовремена администрација на антиген од страна на дендритични клетки максимално подобрување на следните одговор на Т клетките и на тој начин подобрување на препознавање на тумор пептид. Сепак, дендритични клетки е тешко да се културата, а клиничките испитувања спроведени до денес, малку, и ас тие се само во рана фаза.

Видео: 172 рак имунотерапија

испорака на гени

За успехот на системи за испорака на генска терапија се потребни, преку кои лажно ефикасна ген трансфер без оштетување на клетките. Методи на бројот ген испорака.

Физички методи:

• Вбризгување на ДНК во скелетната мускулатура користење на конвенционален шприц и игла;
• трансфер на ДНК преку липозоми;
• балистички трансфекција со користење на злато микрочестички, обложени со плазмид ДНК ( "ген пиштолот").

Предности на физички метод - удобност и безбедност. Недостатоците вклучуваат ниска ефикасност на генот трансфер и минлива природа на својот израз.

Биолошки методи како што се пренос со помош на:

• Бактериски вектори;
• вирусни вектори.

Предноста на користење на биолошката вектори што е на повеќето ефикасен и стабилен метод за да се обезбеди вметнување на ДНК во значителен број на целни kpetok. Недостатоците на овој метод вклучуваат сложеноста на постапката и можноста за формирање во земјата неутрализирање на антитела.

Системска администрација на гени се спречи следниве фактори:

• Висока фреквенција крос-имунолошка реакција со антитела;
• високо имуногена вектори.

Видео: NyuVak. Рак имунотерапија технологија

Затоа, пренос на гени се врши од страна на биолошки метод локалните инјекција.

Изборот на вектор за пренос на ДНК зависи од целта на третманот:

• за генска замена е пожелно да се користи висок вирусни вектори;
• за краток фактички се бара да предизвикаат имунолошка реакција или сензибилизирање клетки да се на терапија со зрачење, може да се користи липозоми.

Испорака може да биде од следните видови:

• ex vivo - трансфер на терапевтски ген во изолираната тумор или рак на клетки, кои потоа се reimplanted во организам на домаќинот;
• in vivo - испорака на гени за да се целните клетки, врз основа на разлики во транскрипцијата на специфичните гени помеѓу туморот и нормално kletkami- овој метод за ген трансфер е помалку ефикасен.