Критериуми за квалитет имуно хормони

Било метод треба да бидат конкретни, чувствителни, точни и имаат добри репродуктивност. Покрај тоа, методот на анализа треба да се развива, така што тоа беше можно да се измери нивото на хормоните во серумот и целата крв и плазма, а понекогаш и во урината и плунката (во случајот, на пример, стероиди). Друг важен критериум - минималниот број и максимално олеснување на работата што треба да се врши од страна на лабораторијата. Сите овие критериуми се дизајнирани до последниот детал од страна на крајот на 1960 година, затоа што ќе се направат неколку забелешки и коментари.

специфичноста

Тоа е најважниот показател за квалитетот на секој метод имуно. Специфичност може да се утврди способноста на методот за откривање на само одреден примерок (анализа) супстанција и не се открие било странски супстанција, дури и многу слични во структурата со него. Со други зборови, специфичност - способноста на метод за да се даде на минимален број на лажни позитиви. Специфичноста на имунолошка проба се утврдува првенствено специфичноста на примарен антитела. Тоа треба да биде особено висок кога хормони испитувања со идентични или слични антигенски детерминанти. На пример, adenogipofizarnye хормони FSH, LH, TSH и hCG се составени од два полипептидни синџири - calamus, назначена со тоа, еден синџир тие се идентични. Ако анализата на која било од овие хормони, како што FSH, како примарна антитела користи nizkospetsifichnuyu поликлонални антисерум, повеќето од антитела врзува со синџири на сите четири хормони, па резултатот од мерењето е лажно позитивни. Овој феномен се нарекува вкрстена реактивност. Крст реактивност е забележано кога мерење на пролактин, кој му припаѓа на иста фамилија со хормон за раст и плацентарен лактоген (сите овие хормони се многу слични N-терминал аминокиселинска секвенца киселина).

Специфичноста на поликлонални основно антитела можат да се подигнат од страна на immunoadsorption колона антисерум со релевантните антигени. Овој пристап е широко се користат пред доаѓањето на хибридомата технологија. Во моментов како примарен антитела е речиси секогаш се користат високо специфични моноклонални антитела кои се врзуваат на антигенски детерминанти единствени на овој хормон.

Специфичноста на имунохемиски анализа не зависи само од својствата на основните антитела, но и од многу други, понекогаш непредвидливи фактори. Особено, специфичноста може да се намали како резултат на вкрстена реакција со основните антитела, некој непознат компонента во тест примерок на серум или плазма. Постојат моменти кога некои промени структура на протеинот од сурутка и поради тоа тој станува антигенска сличност со анализираниот хормон. Конечно, серум компоненти може да биде воведен во активните сајтови на основното антитело и намалување на специфичноста на нивните врзување со антиген. технологија на имуно, постојат голем број на начини да се спречи вкрстена реакција, сепак, не е можно да се предвидат сите изненадувања.

Видео: Живот здрави! Лечење на неплодноста кај мажите

Повеќето системи имунохемиски тест за мерење на нивоата на хормоните во одредени човечки телесни течности (серум, плазма, урина, плунка). Соодветно на тоа, специфичноста на системи за испитување утврдени за овие биолошки течности. Доколку се користи како тест системи за ин витро анализа на хормони, како по инкубација на ендокрините клетки во раствор на Кребс или измамник или во која било култура медиум, тоа е потребно да се провери нивната специфичност особено во такви "абнормална" услови.

чувствителност

Чувствителноста на имунохемиски анализа може да се дефинира како минимална концентрација на супстанца која може да се мери со овој метод. Да се ​​процени чувствителноста со користење на стандарден примерок со позната концентрација на хормонот или други антиген. Овој примерок е подготвен од страна на сериски разредувања на примероци со намалување на концентрацијата на хормоните. Така, чувствителноста на тест систем е директно пропорционална со степенот на разредување на стандарден примерок, со што е можно да се добие точен резултат на мерењето. Чувствителноста на имунохемиски тест систем зависи првенствено од афинитетот на основните антитела, кои се користат во него. Исто така, чувствителноста зависи од видот на имуно тест, на кој е дизајниран систем за тестирање. Општо земено, чувствителен тест системи врз основа на РИА е повисока од базирани тест системи, анализа на immunohemilyuminestsentnogo и ELISA.

Видео: Што е храна? 5 критериуми. Сурова храна, fruktoedenie

Да се ​​процени чувствителноста со користење на стандарден примерок со позната концентрација на хормонот или други антиген. Овој примерок е подготвен од страна на сериски разредувања на примероци со намалување на концентрацијата на хормоните. Така, чувствителноста на тест систем е директно пропорционална со степенот на разредување на стандарден примерок, со што е можно да се добие точен резултат на мерењето.

Чувствителноста на имунохемиски тест систем треба да биде таква што може да се користи за мерење на нивото на хормоните се наоѓа не само во неговата нормална спектар на концентрации, но, исто така, под овој опсег. Затоа тест системи дизајнери се стремиме да се постигне чувствителност помеѓу 3 и 5 перцентили или стандард во опсег помеѓу два и три стандардни отстапувања од долната граница на нормала. На пример, опсегот на нормалните концентрации LH кај жените е 1,1-77 IU / L (2,3 162 pmol / L). Како резултат на тоа, чувствителноста на тест систем за мерење на LH треба да биде околу 0.4 IU / L (0.84 pmol / L). Оваа висока чувствителност е особено важно кога е тоа потребно за мерење на ниски концентрации на LH, особено за диференцијалната дијагноза на примарна аменореа. Во оваа ситуација, LH нивоа под 10 IU / L укажуваат на средно (хипогонадотропни) хипогонадизам, додека повисоките нивоа - од примарен хипогонадизам. Имунохемиски тест систем мора да има висока чувствителност и во оние случаи каде што сакате да го фати дури и најмала промена во концентрацијата на хормоните. Најчесто, овој проблем се јавува во планирањето и оценување на ефективноста на хормонска заместителна терапија. На пример, во третманот на хипотироидизам дозата на левотироксин избраните мерења TSH. ниво Нормално TTG се движи помеѓу 0,4 и 4 mIU / L (2,9-29 pmol / l). додека модерниот тест системи за мерење на TSH имаат чувствителност подобро од 0,01 mU / l (0.073 pmol / l). Повторено високо чувствителни мерења ТСХ овозможи ендокринолог многу прецизно прилагодување на дозата на левотироксин.

Чувствителноста на тест систем зависи првенствено на афинитет на основните антитела, кои се користат во него. Исто така, чувствителноста зависи од видот на имуно тест, на кој се развива систем за тестирање (РИА immunohemilyuminestsentny анализа, ЕЛИСА). На чувствителноста на ПВР и immunohemilyuminestsentnogo анализа на генерално повисока од чувствителноста на ELISA, како и во првите два методи на имунохемиски реакции се одржи во течна фаза, при што антигенски детерминанти на хормони да станат достапни до примарна антитела. Сепак, за истражувачки цели и се направени високо чувствителен тест систем врз основа на ELISA.

точност

Овој степен на блискост на резултатот од мерењето на концентрацијата на хормонот за нејзината вистинска вредност. Точност зависи од чувствителноста и систематска грешка во методот: поголема чувствителност и помала грешка, толку е поголема точност. Точноста на имунохемиски тест системи беше оценета со мерење на концентрација на хормони во стандардни примероци.

репродуктивност

Овој метод способност имунохемиски анализа дава слични резултати се можни само со повторени мерења концентрација на хормони во истата мостра во различни услови (во различни времиња, во различни лаборатории). За да се процени репродуктивност се користи како стандардна примероци добиени од пациенти и примероци. За да се постигне висока повторливост, лабораторијата мора да се зборува за работа со овој метод на тест систем и мерења при стандардни услови (на истата температура, исто траење на реакции).

Видео: Подигнување на технологија - Работа со автоматско биохемиски анализатор ChemWell-T

Специфичност, чувствителност и репродуктивност е задолжително се наведени во упатствата и податоци листови за сите комерцијално достапни системи имунохемиски тест и имунохемиски autoanalyzer. Сепак, секоја лабораторија самостојно треба да ги оцени сите на овие поставки, особено репродуктивност, во вистински услови за работа.