Фагоцитните активност на дендритски клетки. Имунофенотипот на дендритични клетки

дендритични клетки, добиени од клетките на коскената срцевина на глувци беа тестирани за способност за фагоцитоза. На фагоцитната активност на DC во различни фази на диференцијација, активен Immunovac-PE-4, и класична поттикнувач на АЦО ШПРТ созревање ТНФ-а, беше оценета за апсорпција против соеви на S. aureus и S. typhimurium. Како контрола, беа користени макрофагите кои беа подготвени од истата клетките на коскената срцевина од нив култивирање со ГМ-ЦСФ за 7 дена.
Незрелите дендритични клетки повеќе активно фагоцитирани бактерии за разлика од DC третирани Immunovac-VP-4, Ацо и TNF-a.

На фагоцитната активност на макрофагите и дендритичните клетки е испитуван во динамиката против S. aureus и S. typhimurium.
Најактивните беа макрофагите фагоцитоза индекс на нив во однос на S. aureus по 30 мин на инкубација е 86,0 ± 4,8%, и тоа остана на високо ниво за набљудување три часа.

фагоцитната активност незрели DC стимулирани и имуномодулатори на микробно потекло, се значително различни.
Кога се додава на среда култивирање TNF-a или Immunovac-VI-4 (групи 2 и 3), фагоцитни активност беше значително помал, со додавање на Immunovac-VP-4 индекс фагоцитоза беше малку повисока отколку во случај под влијание DC созревање TNF-а. Под влијание на SOA, исто така, покажа намалување на фагоцитоза DCS, но нејзиното ниво е повисоко од Immunovac-VP-4, кои можат да укажуваат на присуство во културата на незрели DCS и макрофагите. Кога се споредуваат степенот на фагоцитоза на S. aureus и С. парти-phimurium значајни разлики се пронајдени записи.

и веројатно, дека поголема активност на дендритични клетки на апсорпцијата на бактерии стимулира Immunovac-VP-4 и Ацо изразување поради Toll-како рецептори на DCS и макрофаги, кои имаат афинитет за патоген-поврзани структури на бактерии. По реакцијата со бактериски производи, DC префрлени во нова функционална држава, се гледа во намалувањето на фагоцитната активност и способноста да се помоќни антиген презентација во споредба со макрофагите.

студија immunophenotypic карактеристики на дендритичните клетки во различни фази на созревање се врши со помош flyuorestseinizotiotsianat и ЈП-етикетирани моноклонални антитела компанија, САД «Caltag».

Степен на диференцијација и зрели дендритични клетки, добиени од клетките на црниот дроб ембрионски глушец е утврдено од страна на промена во нивото на изразување на диференцијација молекули CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, MHC I, MHC II по 3 дена по прилог на незрелите дендритични клетки Immunovac-VP-4, бактериски лизат K. pneumoniae, или TNF-a.

наодите шоу дека ТНФ-а и Immunovac-VP-4 во студирал концентрации стимулира DC созревање. Сепак, судејќи според изразот на диференцијација маркери, TNF-a активира DC созревање во поголема мера отколку Immunovac-VP-4 и лизат К. pneumoniae. На концентрација од 25 ug / ml Immunovac-PE-4 е оптимална за индукција DK- зреење под овие услови нивото на изразување на костимулаторни молекули била повисока. Сепак, изразување на F4 / 80 молекули на DCS стимулирана Immunovac-VP-4 и лизат K. pneumoniae, останаа на високо ниво (23,8 ± 2,6% и 21,2 ± 3,4%, соодветно) во споредба со DC, третирани со TNF-a (0,6 ± 0,2%).

Тоа исто така беше под истрага Имунофенотипот на дендритични клетки, добиени од клетките на коскената срцевина на глувци. Како созревање индуктори користи имуномодулатори на бактериски потекло - Immunovac-VP-4 GMDP, ASO, и како контрола - лизат LPS и К. pneumoniae, и TNF-a.

Активирање на клетките преку Immunovac-VI-4 GMDP и доведува до созревање на клетките. Зголемува изразувањето на костимулаторни молекули, CD38 адхезија молекула. Така концентрациите користи Immunovac-PE-4 имаат различни ефекти врз нивото на MHC. Во доза од 25 ug / ml на MHC I изразување I беше 2,7 пати поголема отколку во концентрација од 50 ug / ml. MHC II израз беше високо на двете дози и нема значајни разлики. GMDP зголемена содржина на DC изразување на MHC класа II.

употребата на лизат K. pneumoniae и LPS зголемена експресија нивоа на костимулаторни молекули MHC молекулите претставување на антигенски I и II.

Кога се користи АЦО ШПРТ како поттикнувач на DC созревање маркер CD34 изразување претрпе значителни промени како функција на доза. динамика забележани само на највисоко дози. Во примената на акутна респираторна инсуфициенција во доза од 0,3 EU / ml зголемена содржина CD80, CD86, MHC I-изразување на клетки. Сепак, нивото на CD86 беше помал отколку со други индуктори на созревање. Изразување на F4 маркер / 80 до DC стимулирана Immunovac-VI-4 може да биде поврзана со присуство на бактериска LPS во вакцина. Овие резултати се потврдени од страна на способноста на DCS добиени претходно третирани со LPS, изразуваат антигените не само зрели DC, но, исто така, рецептори за LPS.

следниве експерименти Ние студирал на изразување на овие маркери во комбинација immmunomodulyatorov микробиолошки потекло (IMMP) со TNF-a. Одгледување на DC во присуство на GM-CSF и IL-4 со додавање на шестиот ден од 2,5 ng / ml TNF-a и IMMP DC созревање стимулирана во поголем обем од доза TNF-a, и намалување на одржување во културата на макрофаги. Сам по себе, ТНФ-а во концентрација од 2,5 ng / ml (група 3) не се индуцираат DC созревање, кога во споредба со контролата (група 2), CD34 незрели маркер беше 5 пати повисока, F4 / 80 - 11,4 пати, се укажува на тоа дека постои значителен интерес во културата на макрофагите. Меѓутоа, кога koinkubatsii 2,5 ng / ml TNF-a изразување се случи со имуномодулатори се зголеми CD38 адхезија молекула, костимулаторни молекули, CD40, CD80, CD86, и MHC I и II класа.

особено ова се однесува на АСО, koinkubatsiya бидејќи со ТНФ-а стимулирани израз на површината маркери специфични за Вашингтон. Оваа го намалува CD34 маркер, кога во споредба со незрели DC (група 1) од страна на 3,4 пати, зголемена експресија на адхезивни молекули CD38 3,2 пати, костимулаторни молекули 38 пати CD40, CD80 и CD86 речиси 9 пати, MHC I 2 7 и MHC II 1,5 пати, на ниво на макрофаген маркер е намален за 3,6 пати. По влегувањето во културата, на среден ТНФ-а и Immunovac-VI-4 е исто така се најде стимулација ефект, изнесувајќи го тоа значително зголемување на изразувањето на MHC I и II и намалување на содржината на F4 / 80, во споредба со акцијата Immunovac-VI-4 во истата доза (табела. 7). Слични резултати се добиени со комбинација на TNF-a (2,5 ng / ml) и GMDP, туку израз на CD40, CD80, CD86 и MHC II бил поголем во случај на комбинација на ТНФ-а и Immunovac-VP-4.
наодите шоу, дека воведувањето на медиумот за култура на мала количина на TNF-a подобрува потенцијал на DC созревање под влијание на имуномодулатори на микробен потекло.